PCR技术已经在临床广泛应用，TaqMan探针定量PCR技术也已经成为临床最常用的核酸检测技术。但是，（a）由于临床的样本中成份非常复杂，而目前临床核酸提取方法不是很完善，由其提取的总核酸包罗各种序列的DNA或RNA；(b)成品PCR试剂盒往往是按照纯净的单一序列DNA经优化实验得到的，其特异性是由两段引物和一个探针共三段特异核酸序列保证（针对TaqMan探针试剂）；(c)传统杂交技术（Southern、Northern等）在杂交温度有偏差时，其特异性无法得到保证，会有一、二个碱基错配的核酸杂交对存在。如果临床样本中恰好存在与TaqMan试剂中三段核酸序列同源、近源（差错一、二个碱基）或具有简并能态的核酸序列，TaqMan探针定量PCR的检测结果中就会存在非特异假阳性反应信号或者定量不准确（多重PCR的竞争性）的情况；（d）如果试剂盒没有采用批批检测作为质控，Taq酶的特异性活性由于运输和储存原因而无法保证，则对于低浓度临床样本（浓度<1000或10000拷贝，即Ct>33时），非常容易出现非特异假阳性信号。四维杂交技术是在传统杂交（或三维杂交，XYZ是表征DNA片段长度，碱基组成和碱基排列）的基础上引入温度作为第四个参数的核酸分子杂交技术。它是在四维温度空间里来描述杂交结果的特异性质。传统概念中，TaqMan探针模式是不能做熔解曲线分析。但是，使用四维杂交反应试剂后，TaqMan探针模式就可以做熔解曲线分析。四维杂交反应试剂中含有独特的专利成份，其测量结果稳定可靠，再重复性好，有助于分析所获得阳性信号的性质（特异性的或非特异性的）。
四维杂交反应试剂背景知识